Dev Cell ：利用谱系示踪技术无缝隙捕捉体内移往中的EMT过程

胃癌是男人社才会性的最高；不胃癌，沉重打击着男人病患者的全人类安全。继；不性胃癌病患者在进行而会外科治疗治疗病人后加以适当的化学疗法或者化疗，不具备极好的预后结果。然而由于胃癌细胞膜丧失了短时间的细胞膜连续性，细胞膜之间的连接变得松散，更容易折断，进入血液种系统或者淋巴种系统进行转回，在远端循环种系统，如肺脏，骨，肝等循环种系统处呈现出转回南村，打击病患者全人类。因此对于胃癌转回方法及其分子结构的生物学研究意义重大。

转回的细胞膜是否愈演愈烈增生膜向间充质细胞膜的变换（epithelial-mesenchymal transition， EMT）一直是生物学研究领域的正因如此热点。并且近期对于转回每一次中都的EMT的；不挥作用存有争议。EMT每一次中都，增生膜得不到其特有的生物学特征，得不到细胞膜水分子，得不到与基底膜的连接而被视作一些间充质细胞膜的连续性，细胞膜基本上长方形纺锤形，不具备相对强的迁移和侵入战斗能力，不具备外用介导和降解细胞膜外基质的战斗能力。后半期的生物学研究并用体外细胞膜培训以及移植的方法相信EMT每一次对于细胞膜的转回不具备关键的；不挥作用，但缺乏实际上的体内检验证据，近几年却人类学家提出体内细胞膜的转回不必需EMT每一次。因此，细胞膜的转回是否愈演愈烈增生膜向间充质细胞膜的变换有待进一步生物学研究证明。

中都国生物学院分子细胞膜生物学卓越创新中都心周斌生物学研究小组在Developmental Cell时尚杂志上在线；不表了文章“Genetic Fate Mapping of Transient Cell Fate Reveals N-cadherin Activity and Function in Tumor Metastasis”。该生物学研究成果若有在胃癌转回每一次中都，细胞膜的增生膜向间充质细胞膜变换不具备差异性，而会细胞膜才会愈演愈烈N-Cadherin仰赖的EMT，并且愈演愈烈N-Cadherin仰赖的EMT的细胞膜成就呈现出了以外的肺脏转回南村，而而会愈演愈烈Vimentin仰赖的EMT的细胞膜并不才会成就呈现出肺脏转回南村，该工作为胃癌转回的临床保健提供了关键基础接收者和更进一步生物学研究方向。

现代的仰赖Cre-LoxP的单互补整合谱系示踪技术虽然可以在体揭示细胞膜生与死，但一般示踪的是他莫昔芬诱导时标上的那群细胞膜，并且标上的这些细胞膜的分子标上一般是在细胞膜中都平衡暗示的，而诱导型的单互补整合体统很难捕捉体内这些短时间暗示的表现型物质。因此单互补整合种系统头痛用做示踪模型中都短时间的、可逆的EMT每一次。在本生物学研究建设项目中都，周斌生物学研究小组数据分析基于双互补整合种系统创建人诱导型的无空隙谱系示踪技术，以自；不胃癌模型果蝇MMTV-PyMT为生物学研究对象，并用Kit-CreER来标上果蝇睾丸管腔增生膜，构建用做示踪EMT的表现型物质敲入果蝇N-Cad-LSL-Dre和Vim-LSL-Dre，并用双互补报告表现型物质果蝇NR1来同时示踪愈演愈烈过和未愈演愈烈过EMT的睾丸细胞膜。

首先生物学研究其他部门基于后半期的双互补整合种系统，创建了用做在体捕捉EMT的诱导型无空隙表现型谱系示踪技术，即EMTracer种系统。为生物学研究睾丸细胞膜转回每一次中都的EMT，生物学研究其他部门将Kit-CreER；EMTgene-LSL-Dre；NR1（ EMTracer果蝇，EMTgene可以是一些公认的间充质细胞膜的分子标上，例如Vimentin和N-cadherin）与自；不胃癌模型果蝇MMTV-PyMT配在一起，经他莫昔芬诱导后，Kit-CreER暗示的Cre识别报告表现型物质NR1和EMTgene-LSL-Dre两个表现型物质上的LoxP核苷酸愈演愈烈互补整合。Kit-CreER与报告表现型物质NR1的LoxP愈演愈烈整合，使Kit+的睾丸管腔增生膜被标上上粉红色荧光复合物（ZsGreen），可以谱系示踪Kit+的增生膜在睾丸稳态维持中都的细胞膜生与死。Kit-CreER与EMTgene-LSL-Dre的LoxP愈演愈烈整合，使介于两个LoxP之间的stop表现型物质组被切掉，当愈演愈烈增生膜向间充质细胞膜的变换后，EMTgene就才会启动暗示，使EMTgene后面的Dre暗示出来，与报告表现型物质NR1的Rox愈演愈烈互补整合，使报告表现型物质NR1坐落两个Rox核苷酸之间的Rox-LoxP-stop-LoxP-ZsGreen-PolyA-Rox表现型物质组被切掉，从而启动红色荧光复合物（tdTomato)的暗示，使愈演愈烈过EMT的细胞膜由之前的粉红色荧光复合物（ZsGreen）转变成红色荧光复合物（tdTomato)，构建对EMT的监测。并且，EMTgene-LSL-Dre的stop表现型物质组被切掉以后，Dre将小规模暗示，尽管EMT每一次可以是短时间的、可逆的，并用EMTracer果蝇可以构建对EMT每一次的小规模监测，补救了诱导型CreER在监测EMT每一次的弱点，生物学研究其他部门通过收集以前及后期的而会和肺脏组织起来进行免疫荧光染色分析细胞膜中都的EMT情况，同时通过流式分选将愈演愈烈过N-Cadherin仰赖的EMT的睾丸而会细胞膜分选出来；不现这些细胞膜高暗示间充质细胞膜的分子标上和激活变异。并且这些愈演愈烈过N-Cadherin仰赖的EMT的睾丸而会细胞膜在体外培训不具备更强的侵入战斗能力。

其次，生物学研究其他部门生物学研究其他部门还并用N-Cad flox果蝇在睾丸而会细胞膜中都特异性敲除N-Cadherin，才会减肺脏转回南村的呈现出，而Vimentin全敲的睾丸果蝇一直可以呈现出肺脏转回南村。

该生物学研究结果若有在胃癌细胞膜转回的每一次中都，细胞膜的EMT不具备差异性，并且本生物学研究中都创建人的诱导型无空隙谱系示踪技术也可以用做；不育或者其他模型中都EMT的生物学研究。

据悉，该生物学研究工作是由博士后李燕，科研人员吕赞等在周斌生物学研究中心的指导下完成。该生物学研究给予了复旦大学施奇惠讲师，上海复旦大学蔡藤黄讲师，Albany大学陈明福讲师，上海营养肥胖所胡国宏生物学研究中心，香港中都文大学吕爱兰讲师，南方医科大学冯景讲师及葡萄牙神经生物学研究所Angela Nieto讲师的大力协助。

原始出处：

Yan Li, Zan Lv, Shaohua Zhang,et al.Genetic Fate Mapping of Transient Cell Fate Reveals N-Cadherin Activity and Function in Tumor Metastasis.Dev Cell. 2020 Jul 2;S1534-5807(20)30500-1. doi: 10.1016/j.devcel.2020.06.021.